Die Tunica muscularis vaginae besteht aus glatten Muskelzellen und lässt eine äußere Längs- und eine innere Zirkulärschicht unterscheiden. Die Längsmuskelschicht ist deutlich stärker ausgeprägt und geht ohne Unterbrechung in die Uterusmuskulatur über. Eine Tunica adventitia begrenzt die Vagina nach außen hin.